細胞活性檢測概述

細胞活性是指樣本中健康的活細胞數(shù)量。細胞活性檢測用于測量細胞響應胞外刺激、化學試劑或療法處理的物理和生理健康情況，或者用于確定細胞培養(yǎng)的最佳生長條件。

細胞活力選擇指南


膜完整性活性染料（核酸染料）

膜完整性是細胞活性檢測中的常用檢測指標。膜完整性染料不會透過細胞，只能通過受損的細胞膜進入細胞。該染料不能穿透活細胞未受損的質(zhì)膜。膜完整性活性染料包括：

PI 和 7-AAD

PI 和  7-AAD 是流式細胞儀常用的具有代表性的 DNA 結(jié)合染料；然而，兩者也可用于熒光顯微鏡。

PI是一種核酸和染色質(zhì)染料，常用于檢測死細胞。在水溶液中，PI的激發(fā)/發(fā)射光譜為493/636 nm；但是結(jié)合DNA后，其熒光會提高20-30倍，激發(fā)/發(fā)射光譜值在535/617 nm。這種染料通常與凋亡檢測染料（如annexin V）聯(lián)合使用；更多信息見以下細胞活性檢測試劑盒一節(jié)。加入 RNase 后，PI 還可用于固定細胞的 DNA 含量檢測，進行細胞周期分析

7-AAD也是一種核酸和染色質(zhì)染料，在結(jié)合DNA后發(fā)生光譜變化。它能選擇性結(jié)合DNA的GC區(qū)域，顯現(xiàn)出獨特的帶型，以進行染色體帶型研究。7-AAD也能用于流式細胞周期分析中，適用于已固定和破膜的細胞。

膜完整性活性染料（氨基染料）

氨基反應性活性染料為非細胞通透性，并可與細胞的氨基蛋白發(fā)生反應。在活細胞中，這些染料與細胞外的伯胺結(jié)合，并發(fā)出微弱的熒光；在死細胞中，這些染料與細胞內(nèi)的氨基蛋白結(jié)合，使得細胞熒光顯著增強。由于染料是與細胞蛋白共價結(jié)合，樣本可被固定和透化，而不會失去其活性染色模式。


酶活性底物

酶活性底物是一種不自發(fā)熒光的熒光試劑，可與活細胞中的細胞酶或受損細胞釋放的細胞酶反應而發(fā)出熒光或顯色。

Calcein AM 染料是細胞通透性底物，用于鑒別活細胞。這些底物可測量酶活性和膜完整性。活細胞的酶活性使酯酶能夠切割 AM 基團，并產(chǎn)生熒光，而活細胞的完整細胞膜是細胞內(nèi)保留熒光染料的必需條件。


細胞活性檢測產(chǎn)品