
細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和定位研究需要專門的細(xì)胞示蹤(細(xì)胞追蹤)熒光探針,首先必須要對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒性,同時(shí)還要有多種熒光染料顏色可供選擇,以便匹配儀器的激光器和濾光片,并能與抗體或其他細(xì)胞分析探針共染。您可選擇用于短時(shí)程細(xì)胞追蹤或長(zhǎng)時(shí)程細(xì)胞追蹤的被動(dòng)擴(kuò)散染料,或能追蹤5天甚至更久的熒光融合蛋白標(biāo)記法。
短期細(xì)胞追蹤
- 可快速加載標(biāo)記(通常 15 分鐘至 1 小時(shí))
- 短期追蹤(一般 3-6 代)
- 可適當(dāng)耐光漂白/抗光淬滅
- 熒光信號(hào)亮度適中
- 信號(hào)分布于整個(gè)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和定位的最簡(jiǎn)單方法就是使用具有膜通透性的探針染料進(jìn)入細(xì)胞并在加載后轉(zhuǎn)變?yōu)槟し峭ㄍ感晕镔|(zhì)。理想的細(xì)胞追蹤染料需要可存留于分裂多代后的子細(xì)胞中,但不會(huì)通過(guò)接觸轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞中。
在工作濃度下保持穩(wěn)定且無(wú)細(xì)胞毒性,可穩(wěn)定存留在細(xì)胞中,且在生理 pH 條件下可發(fā)出明亮的熒光。
選擇短期細(xì)胞追蹤產(chǎn)品
BB-441945 細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye
長(zhǎng)時(shí)程細(xì)胞追蹤
- 細(xì)胞加載標(biāo)記一般需要 1 小時(shí)
- 可長(zhǎng)時(shí)間追蹤(通常 可追蹤6-10 代)
- 具有較強(qiáng)的耐光漂白/抗光淬滅特性
- 熒光信號(hào)亮度高
- 在整個(gè)細(xì)胞中呈點(diǎn)狀分布
細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和定位的長(zhǎng)時(shí)程追蹤需要示蹤熒光染料對(duì)光淬滅具有更強(qiáng)的抵抗性,并且能夠在細(xì)胞中存留更多代。
長(zhǎng)時(shí)程追蹤需要更久的光穩(wěn)定性,通常需要保留 6-10 代;染料標(biāo)記加載時(shí)間在實(shí)驗(yàn)方案中不是特別的重要。
利用熒光蛋白進(jìn)行細(xì)胞追蹤/細(xì)胞示蹤
- 熒光蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)單,直接加入即可
- 放置過(guò)夜孵育
- 可長(zhǎng)時(shí)程追蹤細(xì)胞長(zhǎng)達(dá) 2 周或超過(guò) 10 代
- 可選擇紅色或綠色兩種熒光蛋白
- 可與其他熒光染料或蛋白標(biāo)記同時(shí)多色分析
瞬時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞可在細(xì)胞內(nèi)的不同的特定位置表達(dá)熒光融合蛋白,在生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞群中可表達(dá)至少 5 天或長(zhǎng)達(dá) 2 周。標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè),但并不是細(xì)胞群中的所有的細(xì)胞都能表達(dá)熒光蛋白。
采用熒光融合蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)法追蹤細(xì)胞可提供長(zhǎng)時(shí)程追蹤,但由于并非所有細(xì)胞都能轉(zhuǎn)導(dǎo),故可能不支持部分自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)。
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