蛋白定量

對(duì)大多數(shù)通過生化方法來(lái)提取、分離和分析蛋白的實(shí)驗(yàn)和工作流程而言，準(zhǔn)確進(jìn)行蛋白定量是非常關(guān)鍵的步驟。通常，蛋白定量方法的選擇基于多個(gè)因素，包括與待分析樣品緩沖液成分的兼容性。我們針對(duì)采用光譜儀和酶標(biāo)儀進(jìn)行比色法蛋白定量檢測(cè)的應(yīng)用，提供了各種檢測(cè)試劑、試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)品。

BCA、Bradford (Coomassie)、Lowry和其他定量試劑、試劑盒和定量標(biāo)準(zhǔn)品，可測(cè)定含不同緩沖成分的樣品中的總蛋白濃度。

貝博? BBproExtra? BCA法蛋白定量試劑盒檢測(cè)原理是，在堿性條件下，蛋白質(zhì)將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑相互作用，兩分子的BCA螯合一個(gè)銅離子，形成紫顏色的絡(luò)合物，該復(fù)合物為水溶性，其在562nm處有強(qiáng)吸光性，在一定濃度范圍內(nèi)，吸光度與蛋白質(zhì)含量呈良好的線性關(guān)系。

通過測(cè)定562nm的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。

BCA法是目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最廣泛的蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法，BCA 法快速靈敏、穩(wěn)定可靠，對(duì)不同種類蛋白質(zhì)檢測(cè)的變異系數(shù)非常小。

BCA 法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。在組織細(xì)胞蛋白提取過程中，常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測(cè)結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。

本試劑盒采用牛血清白蛋白（BSA）溶液作為蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

本試劑盒最小檢測(cè)蛋白量可達(dá)0.2μg，檢測(cè)濃度下限達(dá)到10μg/mL。

本試劑盒測(cè)定范圍為20～2000 μg/ml，在此范圍內(nèi)有較好的線性。如需檢測(cè)10ug/ml-200ug/ml的低濃度蛋白樣品，可以選用貝博微量BCA蛋白定量試劑盒（相關(guān)產(chǎn)品BB-34012）。如需檢測(cè)BCA法背景值較高而不適合BCA法的樣品，可以選用貝博Bradford蛋白定量試劑盒（相關(guān)產(chǎn)品BB-3411）。